Machbarkeit von In-vivo-Schweinemodellen mit Führungsdraht

Scientific Reports Band 13, Artikelnummer: 7185 (2023) Diesen Artikel zitieren

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Für präklinische Studien zu neuartigen endoskopischen Techniken und Geräten wurde kürzlich über mehrere In-vivo-Schweinemodelle für benigne Gallenstenose (BBS) berichtet. Ziel dieser Studie war es, die Wirksamkeit und Durchführbarkeit von BBS-Großtiermodellen mithilfe der intraduktalen Radiofrequenzablation (RFA) mithilfe eines Führungsdrahts zu bewerten. Sechs In-vivo-Schweinemodelle wurden unter Verwendung einer intraduktalen RFA zur Kauterisierung bei 10 W, 80 °C und 90 s im Hauptgallengang (CBD) hergestellt. Die endoskopische retrograde Cholangiopankreatikographie (ERCP) wurde mit Cholangiographie durchgeführt und die histologische Untersuchung des Hauptgallengangs erfolgte. Vor, nach und bei der letzten Nachuntersuchung wurden Blutuntersuchungen durchgeführt. Die führungsdrahtunterstützte RFA-Elektrode erzeugte BBS in allen (6/6, 100 %) Tiermodellen ohne schwerwiegende Komplikationen. Durchleuchtungsbefunde zwei Wochen nach der intraduktalen RFA zeigten in jedem Modell BBS im Hauptgallengang. Bei der histologischen Untersuchung wurden Fibrose und chronisch entzündliche Veränderungen festgestellt. Nach dem Eingriff waren ALP, GGT und CRP erhöht und sanken nach einer entsprechenden Drainage. Ein Schweinemodell von BBS wird entwickelt, indem eine intraduktale thermische Verletzung mittels intraduktaler RFA mit Unterstützung eines Führungsdrahts induziert wird. Diese neuartige Technik zur Induktion von BBS bei Schweinen ist effektiv und machbar.

Die endoskopische Gallendrainage wird als Erstbehandlung bei benignen Gallenstenosen (BBS) eingesetzt. Kürzlich wurde berichtet, dass mehrere Kunststoffstents und abgedeckte selbstexpandierende Metallstents vielversprechende Ergebnisse für die Behandlung von BBS1,2 zeigen. Eine ausreichende Gallendrainage über einen langen Zeitraum mithilfe von Gallenstents ist jedoch immer noch eine Herausforderung. Viele biliäre endoskopische Geräte, einschließlich Gallenstents, wurden kürzlich entwickelt, um die Durchgängigkeit der Geräte zu verbessern3,4,5. Diese Versuche, die langfristige Drainagewirkung durch Form- oder Materialveränderung von Kunststoffstents zu erhöhen, zeigen jedoch keine zufriedenstellende Wirkung. Daher besteht ein zunehmender Bedarf an neuen Geräten, die die Einschränkungen bei der Durchführung endoskopischer Behandlungen bei BBS verbessern können.

Vor der Anwendung auf endoskopische Geräte beim Menschen sind geeignete Tiermodelle für präklinische Studien wichtig, um die Wirksamkeit endoskopischer Geräte zu bewerten. Frühere Studien berichteten in der Vergangenheit meist über chirurgisch angelegte perkutane Zugänge6,7,8. Die Verfahren zur Herstellung von Tiermodellen mithilfe chirurgisch hergestellter perkutaner Ansätze waren jedoch mühsam. Kürzlich wurde in mehreren Studien über die Entwicklung von In-vivo- und In-vitro-Tiermodellen für BBS unter Verwendung eines endoskopischen Gallenansatzes berichtet9,10,11. Der erste endoskopische biliäre Ansatz von Rumella et al. verwendete Wärmesonde und multipolare Sonde zur Herstellung von BBS12. Diese Studien wurden jedoch mit anderen Methoden als der intraduktalen Radiofrequenzablation (RFA) für BBS, einschließlich Wärmesonde und multipolarer Sonde, durchgeführt. Selbst wenn ein endoskopischer Ansatz verwendet wurde, wurde das Experiment mit einer nicht-thermischen Verletzungsmethode wie einer endoskopischen abnehmbaren Schlinge durchgeführt. In einigen Studien wurde von einer kurzen Beobachtungszeit berichtet, ohne dass nachfolgende Leberfunktionstests durchgeführt wurden, die üblicherweise in der klinischen Praxis durchgeführt werden.

Im Vergleich zu anderen thermischen Schädigungsmethoden für BBS-Tiermodelle ist die Verwendung eines intraduktalen RFA-Geräts komfortabel und leicht zu kontrollieren. Energiedosis (W), Temperatur (°C) und Expositionszeit (Sek.). Mithilfe von Führungsdrahtmethoden könnten intraduktale RFA-Geräte den Ort und das Ausmaß der Gallengangsverletzung leichter kontrollieren. Es liegen jedoch nur wenige Untersuchungen zur intraduktalen Anwendung von RFA vor. Darüber hinaus ist eine wirksame und sichere Energiedosis für intraduktale thermische Verletzungen bei RFA noch nicht etabliert. Das Ziel dieser Studie besteht daher darin, die Entwicklung reproduzierbarer Großtiermodelle von BBS mithilfe endobiliärer RFA zu bewerten und eine wirksame und sichere Energieoption für die Anwendung bei der Herstellung von BBS zu untersuchen.

In allen sechs Schweinetiermodellen gelang es uns, mittels intraduktaler RFA ein BSS ohne Komplikationen wie Blutungen oder Perforationen zu erzeugen (Erfolgsrate = 100 % (6/6), schwere Komplikationsrate = 0 %). Die Blutspiegel von WBC, AST, ALT, ALP, GGT und CRP aller Versuchstiere wurden vor dem intraduktalen RFA-Verfahren, nach dem intraduktalen RFA-Verfahren (2 Wochen nach RFA) und vor der Tötung der Tiere gemessen (Abb. 1, 2, 3A–G). Die Blutspiegel von WBC, AST, ALT, ALP, GGT und CRP waren nach dem intraduktalen RFA-Eingriff erhöht, sanken jedoch nach dem Gallengangsstenting. Abbildung 1H,I zeigt Gallendurchleuchtungsbefunde 2 Wochen nach der RFA bei den Versuchstieren 1 und 2 und zeigt eine Gallenstenose. Der gleiche Trend der Bluttestergebnisse wie in Abb. 1 wurde in Abb. 2 beobachtet. Der Unterschied zwischen Abb. Der Unterschied zu 1 und 2 bestand darin, dass die Nachuntersuchung 3 Monate nach der Gallenstentierung in Abb. 2 durchgeführt wurde. Die Gallenstenose wurde durch Fluoroskopiebefunde 2 Wochen nach der RFA bei den Versuchstieren 3 und 4 bestätigt (Abb. 2H, I). Die Versuchstiere 5 und 6 wurden nach der Gallengangsstentierung 5 Monate lang beobachtet. Sie zeigten die gleiche Tendenz bei den Bluttestergebnissen (Abb. 3A–G). Eine Gallenstenose wurde auch durch Fluoroskopiebefunde zwei Wochen nach der RFA bei den Versuchstieren 5 und 6 bestätigt (Abb. 3H, I).

Bluttest und Cholangiographie der Gallenstriktur vor der RFA, nach der RFA und bei der Nachuntersuchung nach einem Monat. (A) WBC-Änderungen; (B) T. Bilirubin verändert sich; (C) AST-Änderungen; (D) ALT-Änderungen; (E) ALP-Änderungen; (F) GGT-Änderungen; (G) CRP-Veränderungen von 1-Monats-Follow-up-Schweinen; (H) Cholangiographie der Gallenstriktur bei der Nachuntersuchung nach einem Monat (Schwein 1); (I) Cholangiographie der Gallenstriktur bei der Nachuntersuchung nach einem Monat (Schwein 2). Leukozytenzahl der weißen Blutkörperchen, T. Bilirubin, Gesamtbilirubin, AST-Aspartat-Transaminase, ALT-Alanin-Transaminase, ALP alkalische Phosphatase, GGT-Gamma-Glutamyltransferase, CRP C-reaktives Protein.

Bluttest und Cholangiographie der Gallenstriktur vor der RFA, nach der RFA und bei der Nachuntersuchung nach 3 Monaten. (A) WBC-Änderungen; (B) T. Bilirubin verändert sich; (C) AST-Änderungen; (D) ALT-Änderungen; (E) ALP-Änderungen; (F) GGT-Änderungen; (G) CRP-Veränderungen von 3-Monats-Follow-up-Schweinen; (H) Cholangiographie der Gallenstriktur nach 3 Monaten Nachuntersuchung (Schwein 3); (I) Cholangiographie der Gallenstriktur nach 3 Monaten Nachuntersuchung (Schwein 4). Leukozytenzahl der weißen Blutkörperchen, T. Bilirubin, Gesamtbilirubin, AST-Aspartat-Transaminase, ALT-Alanin-Transaminase, ALP alkalische Phosphatase, GGT-Gamma-Glutamyltransferase, CRP C-reaktives Protein.

Bluttest und Cholangiographie der Gallenstriktur vor der RFA, nach der RFA und bei der Nachuntersuchung nach 5 Monaten. (A) WBC-Änderungen; (B) T. Bilirubin verändert sich; (C) AST-Änderungen; (D) ALT-Änderungen; (E) ALP-Änderungen; (F) GGT-Änderungen; (G) CRP-Veränderungen von 5-Monats-Follow-up-Schweinen; (H) Cholangiographie der Gallenstriktur nach 5 Monaten Nachuntersuchung (Schwein 5); (I) Cholangiographie der Gallenstriktur nach 5 Monaten Nachuntersuchung (Schwein 6). Leukozytenzahl der weißen Blutkörperchen, T. Bilirubin, Gesamtbilirubin, AST-Aspartat-Transaminase, ALT-Alanin-Transaminase, ALP alkalische Phosphatase, GGT-Gamma-Glutamyltransferase, CRP C-reaktives Protein.

Der Durchmesser des gemeinsamen Gallengangs (CBD) betrug im makroskopischen Befund 2,5 ± 0,5 mm. Die nach der Entnahme von Versuchstieren gemessene Länge der Gallenstriktur betrug im makroskopischen Befund 36 mm ± 0,5 mm. Anhand von H&E-gefärbten Gewebeschnitten wurde der Grad der histologischen Schädigung verglichen, indem die Tiefe der Entzündung, der Grad der Ablagerung von Neutrophilen, das Vorhandensein von Schleimhautulzerationen und die Gesamtbewertung untersucht wurden (Abb. 4, 5 und Tabellen 1, 2). . Der gesamte histologische Score, der auf eine histologische Schädigung von Kunststoffstents hinweist, war für den 3-Monats-Punkt höher als für den 1-Monats-Gesamtscore, Median (Bereich) von 1-Monats-Schweinen vs. 3-Monats-Schweinen: 6 ( 6–8) vs. 6,5 (6–8), obwohl ihr Unterschied statistisch nicht signifikant war (p = 0,057) (Abb. 4 und Tabelle 1). Allerdings wurde in der Tiergruppe, in der die Kunststoffstents 5 Monate lang angebracht wurden, beobachtet, dass die Gesamtpunktzahl deutlich höher war als bei denen, die kürzere Zeit angebracht waren (Gesamtpunktzahl, Median (Bereich) von 3 Monate alten Schweinen vs. 5 Monate alten Schweinen). Schweine: 6,5 (6–8) vs. 9 (9–9), p = 0,029) (Abb. 5 und Tabelle 2). Der Grad der Gewebeschädigung wurde mittels Immunfluoreszenzfärbung verglichen (Abb. 6). Von oben nach unten werden Mikrofotografien von H&E, Masson-Trichrome-Färbung und Immunfluoreszenzfärbung mit CK 19 gezeigt. Die H&E-Färbung zeigte den Grad der Ablagerung von Neutrophilen im Gewebe im Kontaktbereich der Kunststoffstents (Abb. 6). Als derselbe Bereich nach der Masson-Trichrome-Färbung beobachtet wurde, wurde eine ausgedehnte Fibrose des Gewebes im Kontaktbereich beobachtet. Unten in Abb. 6 wurde die Immunfluoreszenzfärbung mit CK 19 zur histologischen Auswertung durchgeführt.

Vergleich mikroskopischer Bilder von Gallengangsentzündungen unter Verwendung eines histologischen Bewertungssystems zwischen 1-Monats- (links) und 3-Monats-Follow-up-Tiermodellen (rechts).

Vergleich mikroskopischer Bilder von Gallengangsentzündungen mithilfe eines histologischen Bewertungssystems zwischen 3-Monats- (links) und 5-Monats-Follow-up-Tiermodellen (rechts).

Mikroskopische Bilder von Gallengängen mit Kunststoffstents aus dem Tiermodell Schwein. H–E, MT-Färbung und CK 19-Immunhistochemie (von oben); HE-Hämatoxylin-Eosin, MT-Masson-Trichrom, CK-19-Cytokeratin-19.

Das Ziel dieser Studie war die Entwicklung eines In-vivo-Schweinemodells für BBS unter Verwendung einer führungsdrahtgestützten intraduktalen RFA. Tierversuche mit In-vivo-Gallengängen sind wichtig für präklinische Tests während der Entwicklungs- und Verbesserungsprozesse der pankreatikobiliären Kunststoffstent-Technologie. Laut Literatur kann eine ERCP oder eine laparoskopische Operation durchgeführt werden, um die Zwölffingerdarmpapille zu erreichen und mithilfe einer abnehmbaren Schlinge ein Gallenstenosemodell zu bilden11. Um ein Gallenstenosemodell zu erstellen, kann eine intraduktale Wärmesonde durch Laparotomie oder eine intraduktale Hochfrequenz-Wärmetherapieelektrode verwendet werden10. In dieser Studie wurden Gallenstenosemodelle erfolgreich mithilfe von Radiofrequenz-Wärmetherapieelektroden im Gallentrakt durch ERCP hergestellt, ohne dass es zu Komplikationen nach dem Eingriff wie Cholangitis oder Pankreatitis nach ERCP kam. Es wird erwartet, dass es für die zukünftige präklinische Forschung von großem Nutzen sein wird.

In dieser Studie führten wir eine H&E-Färbung, eine Masson-Trichrom-Färbung und eine Immunfluoreszenzfärbung (CK 19) durch, um eine objektive histopathologische Beurteilung zu erreichen. Darüber hinaus bewertete und berechnete der tierärztliche Pathologe im Tierlabor die histologische Bewertung auf der Grundlage des in der Ergänzungstabelle 1 gezeigten histologischen Bewertungssystems, das häufig in früheren Studien verwendet wurde13,14,15. Es wurde festgestellt, dass die durch Kunststoffstents verursachten histologischen Schäden bei längerer Nachbeobachtungszeit höher waren. Interessanterweise zeigte der gesamte histologische Score keine signifikanten Unterschiede zwischen verschiedenen Zeitpunkten weniger als 3 Monate nach dem Einsetzen der Gallengangsstents. Allerdings wurde 5 Monate nach der Stentimplantation ein statistisch signifikanter Unterschied im histologischen Score im Vergleich zu dem bei kürzerer Nachbeobachtungszeit beobachtet. In Anbetracht unserer Ergebnisse und der Kosteneffizienz der Tierstudie scheint ein Monat nach der RFA der beste Zeitpunkt für die Erprobung der neuen Geräte in den BBS-In-vivo-Schweinemodellen zu sein. Daher wird in der klinischen Praxis empfohlen, den Kunststoffstent nach 3 bis 6 Monaten zu entfernen, was in früheren Studien der durchschnittlichen Durchgängigkeitsdauer entspricht16,17,18, um histologische Schäden zu vermeiden.

Unsere Studie weist mehrere Einschränkungen auf. Erstens handelte es sich um eine präklinische Studie mit Tierversuchen. Die Ergebnisse des Experiments können nicht auf menschliche Reaktionen von Patienten mit gutartiger Gallenstenose übertragen werden. Zweitens unterscheidet sich die Anatomie der Gallengänge bei Schweinen von der beim Menschen. Beim Schwein sind, anders als beim Menschen, der Pankreasgang und der Gallengang getrennt. Abschließend wurden die Wirksamkeit und die Durchführbarkeit anhand einer kleinen Anzahl von Versuchstieren evaluiert. Dennoch hat diese Studie ihren Wert. Es stellt die Entwicklung eines experimentellen Tiermodells für Gallenstenose mit einer reproduzierbaren, sicheren und zuverlässigen Methode unter Verwendung von Radiofrequenz-Wärmetherapieelektroden im Gallentrakt vor.

Zusammenfassend lässt sich sagen, dass die Wirksamkeit und Sicherheit von In-vivo-BBS-Schweinmodellen unter Verwendung einer führungsdrahtgestützten intraduktalen RFA durch eine präklinische Labortierstudie bestätigt wurde. Zukünftig muss eine gute Methode entwickelt werden, mit der sich die Wirksamkeit und Sicherheit von Gallengangsstents aus Kunststoff im menschlichen Körper bewerten lässt.

Für Tierversuche wurden insgesamt sechs weibliche Mikroschweine (Mikroschwein M-Typ; Medi Kinetics Co., Ltd, Pyeongtaek, Gyeonggi-do, Korea) mit einem Durchschnittsgewicht von 50 kg im Alter von 10–12 Wochen ausgewählt. Vor Beginn des Experiments wurden sie eine Woche lang akklimatisiert. Für diese Experimente wurden nur gesunde Tiere verwendet. Alle wurden in einem Tierzuchtraum mit einer Temperatur von 23 ± 2 °C, einer relativen Luftfeuchtigkeit von 50 ± 5 %, einer Belüftungsfrequenz von 10–12 Mal/Stunde und einer Beleuchtungszeit von 08:00 bis 20:00 Uhr gezüchtet und einer Beleuchtungsstärke von ca. 400 lx. Während der Quarantänezeit und der Versuchsperiode wurde jedes Schwein in einen Käfig gesetzt. Zweimal täglich wurde festes Futter (Purina) verabreicht, einmal vor Tagesbeginn und einmal um 16:00 Uhr. Die Experimente wurden nach 24-stündigem Fasten am Tag vor dem Eingriff durchgeführt. Diese Studie wurde in Übereinstimmung mit den relevanten Richtlinien und Vorschriften des Animal Experimental Ethics Committee des Samsung Life Science Research Institute, einer Akkreditierungsstelle für AAALAC International (Association for Assessment and Accreditation of Laboratory Animal Care International) (IACUC-Zulassungsnummer: 20160712001), durchgeführt ) und die Richtlinien „Animal Research: Reporting of In Vivo Experiments“ (ARRIVE-Richtlinien (https://arriveguidelines.org)) wurden für die In-vivo-Studien befolgt.

Insgesamt sechs weibliche Mikroschweine wurden nach dem Zufallsprinzip drei Gruppen (2 Schweine pro Gruppe) zur 1-monatigen, 3-monatigen und 5-monatigen Überwachung zugeteilt. Das Gallenstenosemodell unter Verwendung der Elektroden-Gallenkauterisation wurde auf der Grundlage einer zuvor veröffentlichten Methode10 durchgeführt. Kurz gesagt, nach 24-stündigem Fasten wurden die Schweine von einem Tierarzt mit Ketamin® 50 mg/ml, 20 mg/kg, intramuskulärer Injektion von Zolazepam (Zoletil®; 6 mg/kg) und Xylazin (Rompun®; 2 mg/kg) sediert ). Anschließend wurde eine Trachealintubation durchgeführt. Nach der trachealen Intubation wurde die Anästhesie mit 2 % Isofluran aufrechterhalten. Elektrokardiogramm, Herzfrequenz, Blutdruck, Sauerstoffsättigung und endexspiratorischer CO2-Gehalt wurden vom Tierarzt überwacht. Enrofloxacin (2,5 mg/kg) wurde vor dem Eingriff und 2 Tage nach dem Eingriff intramuskulär verabreicht, um einer durch den Eingriff bedingten Cholangitis vorzubeugen. Am Tag des Eingriffs wurde Ketoprofen (2 mg/kg) zur Schmerzkontrolle intramuskulär verabreicht. Die endoskopische retrograde Cholangiopankreatikographie (ERCP) wurde mit TJF240 (Olympus America, Inc, Melville, NY, USA), einem therapeutischen Endoskop, durchgeführt. Zuerst haben wir die Zwölffingerdarmpapille gefunden und beobachtet (ergänzende Abbildung 1A). Die ERCP wurde mit der drahtgeführten Kanülierungsmethode durchgeführt, bei der der Gallengang mithilfe eines Führungsdrahts unter einem Fluoroskop selektiv kanüliert werden konnte (ergänzende Abbildung 1B). Danach wurden die Ampullae of Vater (AOV) mit einem Hurricane-Ballonkatheter (Boston Scientific Corp., 10 mm Durchmesser) entlang des Führungsdrahtes erweitert. Anschließend wurde die intrabiliäre Radiofrequenzablationselektrode (RFA) zusammen mit dem Führungsdraht in den Gallentrakt eingeführt (ergänzende Abbildung 1C, D). Die im CBD montierte RFA-Elektrode (ELRA-Elektrode, 7–10 W/33 mm Typ, STARmed Co. Ltd, Goyang, Gyeogi-do, Korea) wurde 90 s lang zur Kauterisation bei 10 W und 80 °C verwendet19, 20,21. Um die Kontaktfläche zwischen CBD- und RFA-Elektrode zu maximieren, wurde die Saugtechnik eingesetzt21.

Nach zweiwöchiger intraduktaler RFA wurde eine ERCP durchgeführt, um die Gallenstenose der behandelten Versuchstiere zu bestätigen. Vor und nach dem Eingriff wurden Blutuntersuchungen durchgeführt, darunter weiße Blutkörperchen (WBC), Aspartat-Transaminase (AST), Alanin-Transaminase (ALT), alkalische Phosphatase (ALP), Gamma-Glutamyl-Transferase (GGT) und C-reaktives Protein (CRP). des Verfahrens und bei der abschließenden Nachuntersuchung. Unter Verwendung eines 0,035-Zoll-Führungsdrahts (Hydrophilic Tipped Guidewire, Boston Scientific Corp., Natick, MA, USA) wurden unter Durchleuchtung zwei im Handel erhältliche 10-F-Gallenplastikstents (Polyurethanschlauch mit einem Außendurchmesser von 3,3 mm und einem Innendurchmesser von 2,0 mm; Polyethylenschlauch) eingesetzt mit einem Außendurchmesser von 3,3 mm und einem Innendurchmesser von 2,0 mm) wurden in den Gallengang eingebracht (Abb. 7). Das proximale Ende des Kunststoffstents wurde so montiert, dass es in den intrahepatischen Gallengängen verschiedener Zweige liegt (Abb. 7C).

Durchleuchtung in Schweinemodellen der Gallengangsstenose und des Einsetzens eines Kunststoffstents. (A) Das Schweinemodell der Gallenstenose (Pfeil) wurde durch Cholangiographiebilder bestätigt. Stenose des Hauptgallengangs mit vorgelagerter Dilatation; (B) Kunststoffstents wurden erfolgreich in den Gallengang von Schweinen eingeführt; (C) Kunststoffstents wurden in den erweiterten Gallengang von Schweinen eingeführt. Das proximale Ende des Kunststoffstents wurde in einem anderen Zweig des intrahepatischen Gallengangs platziert (Pfeile).

1 Monat, 3 Monate und 5 Monate nach dem Einsetzen der Kunststoffstents wurde jeweils 2 Schweinen intramuskulär Ketamin (Ketamin®; 50 mg/ml 20 mg/kg) und Zolazepam (Zoletil®; 6 mg/kg) injiziert. und Xylazin (Rompun®; 2 mg/kg) durch einen Tierarzt am selben Tag der Sedierung. Nach der Sedierung wurde eine tracheale Intubation durchgeführt. Die Anästhesie wurde mit 2 % Isofluran aufrechterhalten. Elektrokardiogramm, Herzfrequenz, Blutdruck, Sauerstoffsättigung und endexspiratorischer CO2-Gehalt wurden vom Tierarzt überwacht. Die offene Laparotomie aller Schweine wurde von einem sehr erfahrenen Tierarzt durchgeführt. Es wurde ein mittlerer Schnitt gemacht und der Zwölffingerdarm entfernt.

Die Schweine wurden 1 Monat, 3 Monate und 5 Monate nach dem Einsetzen der Gallenplastikstents eingeschläfert. Anschließend wurde eine histopathologische Untersuchung durchgeführt. Nachdem den Versuchstieren Leber, Gallenwege, Gallenblase und Zwölffingerdarm entfernt worden waren, wurde eine große Menge KCl (Kaliumchlorid) injiziert, um die Euthanasie einzuleiten. Von der extrahierten Leber wurden Gallenwege, Gallenblase, Zwölffingerdarm und AoV bis zum proximalen Ende des Kunststoffstents im rechten und linken intrahepatischen Gallengang präpariert. Nach der Präparation wurde ein Einschnitt in Längsrichtung vorgenommen, um die Stenose des proximalen intrahepatischen Gallengangs und des distalen Gallengangs zu bestätigen. Das Gallengangsgewebe wurde aus dem intrahepatischen Gallengang herausgeschnitten, in den verschiedene Kunststoffstents eingeführt und in Abschnitte geschnitten worden waren, gefolgt von einer H&E-Färbung und einer Masson-Trichrome-Färbung. Eine histopathologische Untersuchung wurde durchgeführt, um die histologische Bewertungsmethode früherer Studien zu verstärken. Die Bewertung erfolgte im Blindverfahren unter Verwendung von H&E-gefärbten Gewebeschnitten. Alle Abschnitte wurden nach dem Ausmaß der Entzündung klassifiziert (1) (1, minimal; 2, auf die Schleimhaut beschränkt; und 3, auf den Muskel ausgedehnt mit Neutrophileninfiltration). Der Schweregrad der Neutrophileninfiltration wurde mit 0 für „Abwesend“, 1 für „Leicht“, 2 für „Mittel“ und 3 für „Schwer“ bewertet (2). Das Vorliegen von Schleimhautgeschwüren (3) wurde mit 0 für nicht vorhanden, 2 für lokal und 4 für diffus bewertet (Ergänzungstabelle 1)13,14,15. Basierend auf dem in der Ergänzungstabelle 1 dargestellten histologischen Bewertungssystem wurde die histologische Bewertung von einem tierärztlichen Pathologen im Tierlabor des Samsung Life Sciences Research Institute berechnet.

Alle Experimente wurden drei- oder mehrmals durchgeführt oder gemessen, um den histopathologischen Score zu vergleichen. Für alle statistischen Analysen wurde IBM SPSS Version 24.0 (IBM Corp., Armonk, NY, USA) verwendet.

Die Datensätze dieser Studie sind verfügbar. Alle vom Rohdatensatz generierten oder analysierten Ergebnisse sind in diesem veröffentlichten Artikel und den Zusatzinformationsdateien enthalten. Eiter, die im Rahmen der Studie generierten Rohdatensätze stehen auf begründete Anfrage für Forschungszwecke beim entsprechenden Autor zur Verfügung.

Gutartige Gallenstenose

Radiofrequenzablation

Endoskopische retrograde Cholangiopankreatikographie

Weiße Blut Zelle

Aspartattransaminase

Alanin-Transaminase

Alkalische Phosphatase

Gamma-Glutamyltransferase

C-reaktives Protein

Hämatoxylin-Eosin

Masson-Trichrom

Zytokeratin 19

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Wir danken BCM für sein Engagement bei der Entwicklung von Tiermodellen. Diese Studie wurde teilweise vom Sungkyunkwan University Research Fund unterstützt.

Abteilung für Innere Medizin, Kangnam Sacred Heart Hospital, Hallym University College of Medicine, Seoul, Südkorea

Jae Keun Park

Abteilung für Gastroenterologie, Abteilung für Medizin, Samsung Medical Center, Sungkyunkwan University School of Medicine, 81 Irwon-ro, Gangnam-gu, Seoul, 06351, Südkorea

Ju-Il Yang, Joo Kyung Park, Kwang Hyuck Lee, Jong Kyun Lee und Kyu Taek Lee

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Konzeptualisierung, Schreiben – Originalentwurf: JKP (Jae Keun Park), Methodik: KTL, Formale Analyse: JIY, JKP (Joo Kyung Park), Untersuchung und Ressourcen: KHL, JKL, KTL, Aufsicht: KTL Genehmigung des endgültigen Manuskripts: alle Autoren .

Korrespondenz mit Kyu Taek Lee.

Die Autoren geben an, dass keine Interessenkonflikte bestehen.

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Nachdrucke und Genehmigungen

Park, JK, Yang, JI., Park, JK et al. Machbarkeit von In-vivo-Schweinemodellen mit führungsdrahtgestützter intraduktaler Radiofrequenzablation bei gutartiger Gallenstriktur. Sci Rep 13, 7185 (2023). https://doi.org/10.1038/s41598-023-33867-9

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Eingegangen: 04. Oktober 2022

Angenommen: 20. April 2023

Veröffentlicht: 03. Mai 2023

DOI: https://doi.org/10.1038/s41598-023-33867-9

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